[口头报告]纸基微流控技术检测污水中的致病微生物

纸基微流控技术检测污水中的致病微生物
编号:3255 稿件编号:604 访问权限:私有 更新:2023-04-13 00:15:36 浏览:264次 口头报告

报告开始:2023年05月07日 16:48 (Asia/Shanghai)

报告时间:8min

所在会议:[5B] 5B、环境科学 » [5B-3] 5B-3 环境科学

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摘要
新冠疫情爆发引发了全球公共卫生危机。污水流行病学已被证明是传染病早期预警的有效策略,但缺乏污水中SARS-CoV-2现场快速检测方法限制了其应用。在本研究中,通过将CRISPR/Cas12a和逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)相结合,开发了一种用于污水中SARS-CoV-2检测的高灵敏度和强特异性便携式纸基设备。首先使用三套RT-LAMP引物组和能够通过碱基配对引导Cas12a识别靶基因片段的gRNAs,构建高保真RT-LAMP方法来检测SARS-CoV-2的N、E和S基因片段。由于CRISPR/Cas12a在高保真扩增产物识别后具有反式切割活性,因此分别采用羧荧光素FAM与猝灭集团BHQ1标记的单链DNA和FAM与生物素标记的单链DNA探针来实现基于荧光或侧流试纸分析的不同可视化途径。然后将反应集成到能够同时检测3个片段的5通道纸设备上。该纸设备对N、E和S基因的检测限分别达到25、310和10 copies/mL。此外,由于N、E和S片段的LOD不同,该方法可在0-310 copies/mL范围内进行半定量。盲样实验表明,该设备具有97.7%的灵敏度和82%的半定量准确度,具有巨大的潜力应用于污水监管新冠疫情。
 
关键字
微流控技术,致病微生物,核酸检测,污水分析
报告人
毛康
中国科学院地球化学研究所

稿件作者
毛康 中国科学院地球化学研究所
曹昊睿 中国科学院地球化学研究所
张华 中国科学院地球化学研究所
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